二价铁、三价铁及总铁离子的测定

                   （邻菲罗啉分光光度法）

1、 原理

亚铁离子在pH值3-9的条件下，与邻菲罗琳反应，生成桔红色络合离子，此络合离子在pH值3-4.5时最为稳定。水中三价铁离子用盐酸羟胺还原成亚铁离子，即可测定总铁。

2、 试剂

2.1、HAc-NaAc缓冲溶液（pH≈5.0）（提取液）：称取136g醋酸钠，加水使之溶解，在其中加入120 mL冰醋酸，加水稀释至500mL。

2.2 、HCl溶液（1+1）。

2.3、盐酸羟胺溶液（10%）：新鲜配制。

2.4、邻二氮菲溶液（0.15%）：新鲜配制

2.5、铁标准溶液的配制

铁标准储备液:准确称取0.7020g硫酸亚铁铵(NH4)2Fe(SO4)2.6H2O],溶于1+1硫酸50mL中,转移至1000mL容量瓶中,加水至标线,摇匀.此溶液每毫升含铁0.1mg.

吸取上述铁标准溶液10mL，移入100mL容量瓶中用水稀释至刻度，此溶液为1mL含0.01mg铁标准溶液。

3、 仪器

3.1、分光光度计

4、  分析步骤

     4.1标准曲线的绘制

       分别取0.01mg/ml铁标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1mL于6只3mL比色管中，加水至约1mL分别依次加入0.2mL 10%盐酸羟胺溶液，稍摇动；加入0.20mL 0.15%邻二氮菲溶液及0.2mL HAc-NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀。放置10min后于510nm处，用比色皿，以试剂空白作参比，测其吸光度，以吸光度为纵坐标，铁离子毫克数为横坐标，绘制标准曲线。

      4.2提取液的测定

      取提取液1mL于3mL离心管中，用盐酸调节使水呈酸性，pH＜3，刚果红试纸显蓝色。加热煮沸10分钟，冷却后加10%盐酸羟胺溶液0.2mL（测二价铁时换成蒸馏水），摇匀，1分钟后再加0.15%邻菲罗琳溶液0.2mL，及0.2mL HAc-NaAc缓冲溶液后用水稀释至刻度。10分钟后于510nm处，以试剂空白作参比，测其吸光度。

5、 分析结果的计算

提取液中总铁离子含量X（mg/L），按下式计算：

         X=A/V×1000

式中：A----从标准曲线查得的铁离子的含量，毫克；

      V----提取液体积，毫升。

6、注释

   测二价铁时提取液不加10%盐酸羟胺溶液，测三价铁时以总铁减去二价铁

7、允许差

   提取液总铁离子含量小于1mg/L时，平行测定两结果差不大于0.03mg/L。

8、结果表示

   取平行测定两结果算术平均值，作为提取液的总铁离子含量。

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